服务热线 :027-65527511

生物技术药物的分析检测方法

  • 作者 :
  • 上传时间 :2021-06-17
  • 浏览次数 :
  • 返回上级

随着医药行业的飞速发展 ,生物技术药物的研究也进入了更高一级平台 。生物技术药物是指通过DNA重组技术或其他创新生科技型生物技术生产的治疗药物 ,主要包括细胞因子 、纤溶酶原激活剂 、重组血浆因子 、生长因子 、抗体 、疫苗和寡核苷酸药物等 ,临床应用于治疗恶性肿瘤 、心脑血管疾病 、糖尿病 、类风湿性关节炎等重症疾病 。生物技术药物的治疗效果显著 、副作用较小 ,逐渐成为新药研制的重点 。

根据IMSHealth预测 ,至2020年 ,我国生物技术药物市场将成为全球第二大生物医药市场 ,成为国民经济的重要组成内容 。生物技术药物不同于传统的化学合成药物 ,若生产 、储存 、运输过程操作不当 ,极易引起药物蛋白的异构或异变 ,病患用药时可能会发生难以预计的不良反应 ,因此 ,对生物技术药物质量分析检测显得尤为重要 。随着《中华人民共和国药典》(2020年版)颁布实施 ,生物药物分析与检测技术也不断更新完善 ,生物技术药物的质量控制将会大幅提高 ,分析检测标准逐步与国际接轨 ,药品质量将达到国际水平 。本文结合当前科技发展趋势,对生物技术药物进行分析和检测的方法进行阐述 ,期待为生物技术药物分析检测技术的长远发展作出一定贡献 。

生物技术药物概述

生物技术药物融合了生物学 、医学 、制药等多领域的先进技术 ,是以生物信息技术和基因工程为基础建立起的生物产业 。生物技术研制出的蛋白质 、蛋白质修饰物 、生物激酶 、抗体及细胞因子 、核酶等药物 ,在精准医疗的带动下 ,在新药研发 、临床治疗和传统药物改进中得到广泛的应用 。

生物技术药物分析检测

生物技术药物分析是一门集研究、检测和控制于一体的综合性学科 ,主要是分析鉴定各类生物技术药物的化学组分 、构型 、形貌特征 ,检测药物质量 、不同药物中各组分含量 、药代降解产物的含量 。生物技术药物 ,特别是蛋白质药物 ,由于自身稳定性较低 ,极易发生部分肽链断裂或折叠 ,而导致蛋白质团聚失效 ,在原料药生产 ,生物制剂储存 、运输至临床应用的各个环节均应进行产品质量分析检测 ,全面监控生物技术药物质量品质 ,保障病患治疗用药的安全 、合理和有效 。

生物技术药物分析检测主要工作包括药物分析与检验 、杂质与安全检验、氨基酸类药物的分析与检验 、多肽及蛋白质类药物的分析与检验 、酶类药物的分析与检验 、脂类药物的分析与检验 、核酸类药物的分析与检验 、糖类药物的分析与检验 、基因工程药物的质量控制 。

分析检测方法主要有化学法 、仪器分析法及生物检定法 。分析检测常规步骤如下 :审查→取样→鉴别→检查→含量检测→记录→出具检测报告 。

(1)化学法

化学法分析检测生物技术药物组分含量 ,主要包括重量法和滴定法 。重量法是通过精准称取定量待测物 ,根据相关单质和化合物的质量 ,计算待测物中目标物质的含量的定量法 。滴定法是化学实验室使用的常规方法 ,测定数据准确但操作繁琐 ,氨基酸类药物多用滴定法对其含量测定 。

(2)仪器分析法

仪器分析的灵敏度较高 ,用于微量和痕量分析检测 ,包括光学法 、电化学法 、色谱法 、电泳法、酶法分析法和免疫分析法等 。随着现代精密分析仪器不断研究问世 ,生物技术药物的分析检测手段也愈发精准完备 。

 a.凝胶电泳法十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)

凝胶电泳法十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)是在蛋白质类生物技术药物常用的分离和检测方法 ,其迁移速率取决于分子量大小 。SDS-PAGE适用于分离和检测分子量为5~500kDa的寡聚蛋白质 ,该类蛋白质共价键在聚丙烯酰胺环境下较为稳定 ,通过调节梯度凝胶或特定缓冲体系可以进扩大分子量的检测范围 ,SDS-PAGE的局限性在于检测范围较窄 ,由于加热过程可能会导致蛋白质类药物在K12中非正常降解 ,其定量的准确性欠佳 。

 b.超速离心法超速离心法(AUC)

超速离心法超速离心法是根据不同生物药物沉降特质(分子形貌 、构型 、分子量大小有关) ,通过超速离心机对待测样进行离心分离 ,检测系统动态监控药物分子的沉降情况 ,分析检测待测样品的理化性质 。沉降平衡法与沉降速率法属于超速离心法范畴 。通过沉降平衡法可得到生物药物分子的相关化学计量信息 ;沉降速率法可得到分子的分子体积和构型等流体力学性质 ,是寡聚蛋白质检测常用分析方式 。

 c.光学浊度法

研究表明 ,散射光的散射角和强度与悬浊液中物质粒径 、形貌等参数相关 。将生物技术药物配制成悬浮液 ,测定透过溶液的光的散射程度分析检测药物相关理化参数。浊度法是利用溶液中颗粒悬浮物的Rayleigh散射特性测定溶液浑浊度的方法。生物技术药物的蛋白质类制剂 ,可通过浊度法快速测定蛋白质的浓度 、悬浮粒径的大小 ,广泛应用于蛋白质液体制剂聚合程度的分析检测 。

 d.色谱法色谱法

色谱法色谱法的优势在于灵敏度高 、可精准定量并能够同时检测混合组分中待测物含量 ,其在分析检测研究中的地位难以取代 。高效液相色谱法(HPLC)采用了高效固定相 、高压输送流动相和在线检测技术,对生物技术药物进行有效成分分析 、鉴定 、检测且不影响其分子构型和生化活性 。我国在新药临床实验前的审批流程中明文规定 :新药的药物代谢动力学实验应首选HPLC检测 。

(3)生物检定法

免疫分析法生物技术药物具有免疫原性 ,这为免疫分析法应用提供相应平台 。酶联免疫吸附法(ELISA)精准灵敏 、稳定性好 、设备自动化程度高 、可批量检测 、无放射危害是生物技术药物免疫分析中常用的分析方法 。

免疫分析法和生物分析法都会受到活性代谢产物 、生物基质 、血清中抑制因子等因素干扰或特质性限制 ,无法全面分析检测生物技术药物在生物体内降解过程的完整信息 。

  • 服务热线
    服务热线 : 027-65527511
  • 电子邮箱
    电子邮箱 : lxw990412@163.com
  • 公司地址
    公司地址 : 武汉市江夏区高新大道666号光谷 生物城生物技术研究院B4栋